膠片的色調(diào)（或稱反差）。當一種照相乳膠片用它所敏感的波長光照射時，在曝光量（光流量x曝光時間）和被顯影后底片上銀穎拉的數(shù)量之間存在著一定的關系。單位面積底片上銀顆粒的數(shù)量稱為密度，顯微鏡它可以用密度計來測量，當?shù)灼系拿芏菵對應于曝光量的對數(shù)被繪成曲線時，就可以看出兩者之間并不是一個簡單的線性關系。只有在曲線的p-q部分存在著線性關系，數(shù)碼顯微鏡當達到高峰值后，曝光量的進一步增加反而引起密度的降低。線性的P-9部分具有一定的斜度，這個斜度就是膠片的色調(diào)或者稱為膠片的反差（注意不要與像的反差混淆），它的度量單位是伽馬，但也可以用角a表示。當a二450時，伽馬是1，當a>450,曝光量上的小的變化就會引起底片密度的大幅度變化，這時膠片的反差就大，這種膠片被說成是硬的，當a<45曝光量上的大的變化只能引起底片密度的較小顯微鏡變化，這時膠片的反差小，這種膠片可以說是軟的。可以看出曲線的P-9部分在橫坐標上的投影將指示出膠片曝光的合適范圍，并且這個因素是同膠片的反差相關的。

    由于在生物學和醫(yī)學中所遇到的大多數(shù)顯微鏡標本成分之間的吸收差異是不太大的，因此在顯微照相中應采用反差較大的膠片來補償顯微鏡像較小的反差。另外還可以通過延長顯微鏡顯影時間或增高顯影液濃度來增大顯微鏡底片的反差。

    膠片的感光速度。數(shù)碼顯微鏡的膠片的感光速度在歐洲是用DIN數(shù)表示，在美國及其他許多地區(qū)使用ASA系統(tǒng)。DIN值每增加3個數(shù)字，感光速度增大1倍，而ASA系統(tǒng)是以幾何級數(shù)加倍的，現(xiàn)將兩種系統(tǒng)的對應關系（每級感光速度增加十倍）列在下面:

   在許多情況下對于顯微照相中不移動的標本來說膠片的感光速度不是很重要的，除了很快褪色的標本以外，顯微鏡不需要用感光速度很快的膠片。一般可以說膠片的顆粒愈細，反差愈大，感光速度也就愈慢，在顯微照相中大多采用具有較細顆粒、顯微鏡適當高分辨力和中等反差的膠片。